高考生物考点分类试题
（选修3：现代生物科技部分）
1．(07模拟：江苏南通二次调研)3.下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是
A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养
B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞
C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞
D.利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞
【答案】D
2．(高考试题：2007上海生物)13．下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是
A．花药、胚不能作为组织培养的材料
B．植物细胞具有全能性
C．外植体是指用于培养的植物组织或器官
D．外植体可诱导出愈伤组织
【答案】A
3．(06模拟：山东青岛上期末调研)下面对动物细胞融合技术及意义叙述不合理的是
A．将来有可能通过此方法来生产白细胞介素
B．通过克服远源杂交不亲和现象来获得新物种
C．有助于对细胞这一生命单位的更为科学的认识
D．融合本身与生物膜的流动性直接相关
【答案】B
4．(06模拟：山东青岛上期末调研)下列关于植物组织培养形成试管苗和将试管苗进行无土栽培的叙述，正确的是
A．都要经过脱分化和再分化的过程 B．培养液中都必须含有必需矿质元素
C．培养液都必须含有有机添加物 D．都必须给予较强的光照
【答案】B
4 5．(高考试题：2007全国理综II)下列有关基因工程中限制内切酶的描术，错误的是
A 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B 限制性内切酶的活性受温度的影响
C 限制性内切酶能别和切割RNA
D 限制性内切酶可从原核生物中提取
【答案】C
6．(高考试题：2007江苏生物)21．在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA，可以依据的原理是
A．在物质的量浓度为0．14 mol／L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小
B．DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色
C．DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精
D．质量浓度为0．
【答案】C
7．(高考试题：2007江苏生物)29．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有
A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B．有无血清对正常细胞培养的影响不同
C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
【答案】BCD
8．(07模拟：广东佛山二质检)40.材料二：为大力发展我国奶牛养殖业，科学家们对育种途径进行了大胆探索，下图为相关构思过程：
（4）该过程所涉及的现代生物技术有_____ 、 、
和 。
（5）目前使用的供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是__________ _。
（6）在供体细胞与受体卵母细胞结合之前，先要去掉受体卵母细胞的核的原因是：
。
材料三：运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），如右图。
（7）在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。
（8）体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？
为什么？_________________________________ 。
【答案】40．共15分。除说明外，每空1分。
（1）细胞的全能性
（2）不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖（2分）
（3）获取有活力的原生质体（或去壁） 诱导原生质体融合
（4）动物细胞培养、核移植技术、胚胎体外培养、胚胎分割、胚胎移植
（5）传代10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型（或传代10代内细胞的遗传物质一般不会发生突变）
（6）使所得犊牛的遗传物质基本上全部来自优质供体奶牛
（7）胰蛋白酶 （8）不能；胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖而不发生分化
9．(高考试题：2001上海)(2001上海高考卷)（11分）现有甲、乙两个烟草品种（2n=48），其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克司时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。
取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克司光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：
（1）甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为 和 。
（2）将叶肉细胞制成的原生质体时，使用 破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是 。
（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫 。
（5）在大于800勒克司光照下培养，有 种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由 的原生质体融合来（这里只考虑2个原生质体的相互融合）。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是 ，基因型是 。该植株自交后代中，在大于800勒克司光照下，出现不能生长的植株的概率是 。
【答案】（1）[3] 细胞质 [2]核糖体
（2）细胞核 核孔 （3）[7]叶绿体基质ATPNADPH（答能量和氢也对）
（4）[4] [5] 叶绿体
（5）[1] [2] 能量（或ATP） 蛋白质（或载体）
10．(07模拟：广东广州一模)40．(15分)请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是
①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是
②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在 酶的作用下延伸形成DNA。
③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的 和 。
④如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括 。
A．生物安全 B．环境安全 C．食品安全 D．伦理道德问题
⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能_设计预期的蛋白质结构_推测应有的序列→找到相对应的 序列。
（2）在DNA粗提取与鉴定的实验中，选择适当浓
度的NaCl溶液就能充分溶解DNA而使杂质沉
淀，或析出DNA过滤去除溶液中的可溶性杂
质。请在右图中作出DNA在NaCl溶液中的溶
解度曲线。
（3）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：
①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用 处理，作用是去除 。
②经人工诱导后，骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行
（4）请回答下列有关胚胎工程的问题：
①在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是 ，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
②人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于 阶段。
③在胚胎工程中，通过给良种母畜注射外源 ，使其排出更多的卵细胞，称为
超数排卵。
【答案】
40．(15分)
（1）目的基因的检测与表达
①限制性核酸内切酶(或限制酶)
(DNA聚合'
③脱分化 再分化
④ABC ⑤氨基酸 脱氧核苷酸
（2）见右图
（3）①纤维素酶和果胶酶 细胞壁
②筛选和检测
（4）①使供、受体的生理状态相同 ②囊胚
11．(07模拟：山东潍坊4月理综)35．(8分)【生物-现代生物科技专题】
基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导人人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分? 。
(2)检测高产奶牛体内是否出现El蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么? 。
(3)胚胎工程最后一道工序的实质是什么? 。
(4)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割? 。
【答案】
12．(高考试题：2001上海)（11分）现有甲、乙两个烟草品种（2n=48），其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克司时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。
取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克司光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：
（1）甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为 和 。
（2）将叶肉细胞制成的原生质体时，使用 破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是 。
（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫 。
（5）在大于800勒克司光照下培养，有 种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由 的原生质体融合来（这里只考虑2个原生质体的相互融合）。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是 ，基因型是 。该植株自交后代中，在大于800勒克司光照下，出现不能生长的植株的概率是 。
【答案】（1）B 22AA+XY
（2）DNA 蛋白质
（3）X（在图上圈出X，少一个不给分）3
（4）24 碱基 （答DNA也给分）
（5）开放性题目，只要学生用生物学知识来说明，就可以给分。（如：不赞成，因为基因被吃入后，和其他生物大分子物质一样被消化分解，不可能以原状进入细胞，更不可能补充或整合到人体原有的基因组中去。赞成，基因被吃下后，消化分解为简单物质，可作为DNA的原料。）
13．(高考试题：2001上海)（11分）现有甲、乙两个烟草品种（2n=48），其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克司时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。
取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克司光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：
（1）甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为 和 。
（2）将叶肉细胞制成的原生质体时，使用 破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是 。
（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫 。
（5）在大于800勒克司光照下培养，有 种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由 的原生质体融合来（这里只考虑2个原生质体的相互融合）。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是 ，基因型是 。该植株自交后代中，在大于800勒克司光照下，出现不能生长的植株的概率是 。
【答案】（1）常 显 （2）世代相传 患病 1/2 （3）X 隐 隔代交叉（答隔代、交叉、男性多于女性、伴性遗传的其中之一都给分） aaXbY AaXbY 1/4
14．(高考试题：2006上海)农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题。
(1)要获得该抗病基因，可采用________、________等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的载体是________。
(2)要使载体与该抗病基因连接，首先应使用________进行切割。假如载体被切割后，得到的分子末端序列为
，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是………… ( )
A. B. C. D.
(3)切割完成后，采用_______酶将载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为______。
(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去________棉花细胞，利用植物细胞具有的________性进行组织培养，从培养出的植株中________出抗病的棉花。
(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是……………………………………………( )
A．淀粉 B．脂类 C．蛋白质 D．核酸
(6)转基因棉花获得的________是由该表达产物来体现的。
【答案】(1)从细胞中分离 化学方法人工合成 Ti质粒 (2)限制性内切酶(限制酶) A
(3)DNA连接酶 重组DNA (4)感染 全能 筛选(选择) (5)C (6)抗病性状
15．(07模拟：山东济宁二模理综) 35．(8分)[生物一现代生物科技专题)
根据下图回答问题。
(1)过程A是基因工程中的____ 最常采用的方法是____
(2)过程B、C分别为____
(3)进行过程D时，该技术的优势是____
【答案】35．(共8分，每空2分)
(1)将目的基因导入细胞 显微注射技术
(2)胚胎移植、细胞核移植
(3)充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
16．(高考试题：2005天津)（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？
【答案】（1）
①
②
17．(07模拟：福建厦门三月质检)54．（9分）下图是单克隆抗体制备流程阶段的示意图。请回答下列相关问题：
（1）小鼠体内的淋巴细胞是由 中的 细胞分化、发育而来的。
（2）特定抗原被注入小鼠体内经吞噬细胞的摄取和处理暴露出 之后，由吞噬细胞呈递给 。B细胞接受刺激后进行一系列的增殖、分化，形成能产生特异抗体的B细胞和记忆细胞。
（3）如果只考虑细胞两两融合，则①过程形成的杂交细胞有 种。
（4）在过程②中能生长、分裂的细胞是 。
（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是 。
（6）单克隆抗体在实践上有很高的实用价值。人们正在研究制备既能消灭癌细胞、又不会伤害健康细胞的"生物导弹"，设想是
。
【答案】54．（9分）（1）骨髓 造血干（各1分，共2分）
（2）抗原决定簇 T细胞，再由T细胞呈递给B细胞 （各1分，共2分）
（3）3 （1分） （4）杂交瘤细胞 （1分） （5）特异性强，灵敏度高（1分）
（6）在单克隆抗体上连接抗癌药物，将药物定向带到癌细胞所在部分（2分）
55．（11分）（1）葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、动物血清（1分）
18．(07模拟：宁夏理综适应训练)生物选修3-现代生物科技专题
干扰素是抗病毒，抗肿瘤的重要药物，最初必须从人的血液中提取，每升血液只能提取0.05μg，价格昂贵。现在已经能够利用基因工程技术生产干扰素，其生产成本和价格大大降低。
据图回答：
（1）图中的②存在与细菌体内，在基因工程中常用作（ ）
（2）由①和②构建重组DNA的过程中，需要使用的工具酶有（ ）
（3）干扰素基因控制干扰素合成，其基因过程包括（ ）。
（4）导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒，有的导入普遍质粒，只有少数导入的是带干扰素基因的质粒。所以在基因工程的操作步骤中必须要进行（ ）
（5）目的基因导入细菌细胞后，并不影响细菌内其他基因的表达，原因是（ ）。
【答案】生物选修3--现代生物科技专题
（1）运载体（3分，或运载工具、载体都得分）
（2）限制性核酸内切酶（或限制性内切酶）和DNA连接酶（3分，只答出一项得1分）
（3）转录和翻译（3分，只答出一项得1分）
（4）目的基因的检测与鉴定（或目的基因的表达和鉴定，或目的基因的检测和表达）（3分）
（5）基因有独立性。（3分）
19．(高考试题：2007上海生物)39．（9分）本题为分叉题。A适用于《生命科学》教材，B适用于《生物》教材。A和B中任选一题，若两题都做以A给分。
A．下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题
（1）人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异________：从免疫学角度看，这种凝集原是________。
（2）图中细胞中1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的________细胞，这种细胞具有产生________________的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能________________，但不会产生抗体。
（3）为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为________________。把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为________________。
（4）过程①的主要目的________________________。通过过程②或⑧的培养方法能产生大量________________________抗体。
【答案】39．（9分）
A．（"糖蛋白 抗原（每格1分）
（2）免疫B淋巴 单一的抗A抗体（或单一的特异性抗体）
快速大量增殖（每格1分）
（3）杂交瘤细胞 单克隆（每格1分）
（4）筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 抗A单克隆（每格1分）
20．(07模拟：江苏扬州4月调研)34．(8分)下图是"白菜一甘蓝"杂种植株的培育过程(已知两种植物均为二倍体)。请据图回答有关问题：
(1)①②过程所用的化学试剂依次为_______________________________________。
(2)培育出的新植株既有白菜生长期短的优点，又有甘蓝易于储存的特性，从分子水平来说，这是由于_____________________________________________。
(3)新的植物体能克服远源杂交不亲和的障碍而结种子，是因为_______________________。
(4)某同学提出，用上图所示方法不能获得纯种，若用白菜和甘蓝的花粉细胞代替图中的体细胞再采用上图所示的过程即可获得纯种。该同学的方案中有缺陷，请对该方案加以完善。________________________________________________________________________________________________________。
(5)在培养杂种细胞至幼苗的过程中，培养基中通常要加入植物激素。右图表示研究人员配制了不同的细胞分裂素和生长素比例后，植物组织培养时生长的状况，请分析图回答有关的问题：
①在进行植物组织培养的过程中，图中两种激素的配合使用是为了人为地控制细胞的_________________________________________和_________________过程。
②分析图可知，组织培养要获得大量的茎叶，则细胞分裂素和生长素的比例应控制在________________________。如果通过组织培养要获得大量紫草素，则细胞分裂素和生长素的比例应控制在_________________________________。
【答案】34．(8分)
(1)纤维素酶、果胶酶和聚乙二醇
(2)两种植物的基因都能被选择性表达
(3)细胞中有同源染色体，能产生正常的配子
(4)应对白菜-甘蓝的幼苗用秋水仙素处理后再筛选
(5)①脱分化 再分化(或分裂 分化) ②比值大于1 比值等于1
21．(07模拟：山东济南4月理综)35．（8分）【生物-现代生物科技专题】
下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：
（1）在基因工程中，A表示 ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使甲的酶区别于其他酶的特点是 ，B表示 。
（2）B→C为转基因绵羊的培育过程中，其中④用到的生物技术主要有动物细胞培养和
。在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CO2，其主要作用是 。
（3）B→D过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是 。要确定目的的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程： 。
【答案】（8分）【生物-现代生物科技专题】
（1）目的基因 能够识别特定的脱氧核苷酸序列 重组DNA
（2）胚胎移植 维持培养液的pH
（3）植物组织培养 让害虫吞食转基棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状（2分）
22．(07模拟：山东聊城5月理综)35．（8分）【生物-现代生物科技专题】
金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，从而降低了观赏价值。科学家在某种植物中工到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种。请据图回答：
（1）获得②一般用 的方法，①和②结合能形成③，最重要的是①和②经处理后具有 。
（2）在⑤和⑥过程中，获得抗病基因的金茶花细胞将经历 过程后才能形成⑦。
（3）欲快速培育大量该抗病新品种，应该采用的技术是 。
【答案】35．（每空2分，共8分）【生物-现代生物科技专题】
（1）人工合成基因（成从基因文库获得）相同的黏性末端
（2）脱分化和再分化
（3）植物组织培养
23．(07模拟：山东泰安二模理综)35．(8分)[生物--现代生物科技专题]
科学家经过长期的实验，采用体细胞杂交的方法，克服了物种间的生殖隔离，终于按下列技术流程得到了"番茄一马铃薯"杂种植株，请据图回答：
(1)图中A处理表示的含义是_____________________
(2)B处理表示__________，具体说明可使用的两类方法：___________________
(3)C过程发生的变化为______________________。
(4)确保D过程的顺利进行应注意的问题是_____________________________
(5)目前，该项研究并没有如科学家所想像的那样达到预期效果，但其重要意义是_______
(6)科学家利用植物体细胞杂交技术获得的优良品种，可通过人工种子来大量繁殖和推广，请设计制备人工种子的主要流程：__________________________。(2分)
【答案】35.(8分)(生物--现代生物科技专题)
(1)分别用纤维素酶和果胶酶处理两种细胞获得原生质体。
(2)进行原生质体融合 使用离心、振动、电激等物理方法和使用聚乙二醇(PEG)的化学方法
(3)经过脱分化，培养出愈伤组织
(4)将生长良好的愈伤组织转移到分化培养基上培养
(5)克服了不同生物远缘杂交的障碍(在培育种间属间杂交方面有较高的应用价值)
(6)诱导愈伤组织→愈伤组织再分化(胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等)(1分)→机械化人工薄膜包装形成人工种子(1分)
24．(07模拟：广东佛山一模)41．（15分）干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质。科学家利用基因工程技术从人的T淋巴细胞中提取干扰素基因转入羊的DNA中，培育出羊乳腺生物发生器，使羊乳汁中含有人体干扰素。请回答：
（1）科学家将人的干扰素基因与乳腺蛋白基因的______________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的___________细胞中，然后，将该细胞送入母体内，使其生长发育成为 动物。
（2）在该工程中所用的基因"剪刀"是 。将人体干扰素基因"插入"并连接到羊体细胞DNA上所需要的酶是 。人体干扰素基因之所以能"插入"到羊的DNA内，原因是 。
（3）请在下框中画出某DNA片段被切割形成黏性末端的过程示意图。
（4）如何检测和鉴定人的干扰素因素已被成功导入羊体内？请写出两种方法：
、 。
（5）为了使T淋巴细胞在体外产生大量的干扰素，有人进行了实验，可是当将T淋巴细胞在体外培养繁殖了几代后，细胞分裂就停止了。请你用细胞工程的方法，以小鼠为实验对象，提出一个既能使T淋巴细胞在体外培养繁殖，又能获得大量小鼠干扰素的实验设计简单思路:
____ ___
【答案】41．15分。除说明外，每空1分。
（1）启动子 受精卵 转基因（或成熟） （2）限制性内切酶 DNA连接酶
用相同的限制性内切酶催化反应后形成了互补碱基序列（或不同生物DNA的结构具有统一性）(2分)
（3）（3分）（补充出DNA的互补链给1分，写出两个黏性末端各给1分）
（4）分子检测；DNA分子杂交；DNA与mRNA分子杂交；或抗原抗体杂交；从羊的乳汁中提取干扰素（以上任意任出两点即可）
（5）将人的T淋巴细胞与小鼠的瘤细胞在体外融合，筛选出既能产生干扰素又能无限增殖的杂交瘤细胞，然后在适宜条件下进行细胞培养(3分)。
25．(07模拟：山东临沂二模理综)35．(8分)[选修3：现代生物科技专题]
现有两种同科不同属的农作物，甲植物高产不耐盐，乙植物低产但耐盐；欲培育出既高产又耐盐的植株，以适应于盐碱地栽培。请回答：
(1)采用______(杂交，嫁接，转基因)方法可以达到上述目的，这种育种方法的优点是________
(2)如采用细胞工程育种，做法如下：
①甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是_________。以胚状体为材料经过人工薄膜包装得到的人工种子，在适宜条件下，同样能够萌发成幼苗，与天然种子相比，人工种子具有哪些显著的优点?(列举2条)__________________
②动物细胞工程应用较广泛的是单克隆抗体的制备，单克隆抗体最主要的优点是具有特异性强、灵敏度高的特点，原因是______________________________。
【答案】35.(1)转基因(1分) 按照人们的意愿打破种属的界限。在分子水平上定向地改造生物的性状(遗传特性)(2分) (2)①再生出细胞壁(1分) 不发生性状分离，保持亲本的优良性状；生产上不受季节的限制；人工种皮起保护作用，比试管苗容易运输等。(2分) ②单克隆抗体是单个月淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、增殖后产生的抗体。(2分)
26．(高考试题：2006江苏)(9分)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) ▲ 技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于 ▲ 培养基。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 ▲ 。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用 ▲ 。
(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 ▲ 特点，又具备淋巴细胞的 ▲ 特点。
(6)淋巴细胞是由动物体 ▲ 中的 ▲ 细胞分化、发育而来。
(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 ▲ 。
【答案】(9分)
(1)动物细胞培养(微生物培养)
(2)选择
(3)特异性强，灵敏度高
(4)灭活的病毒
(5)在体外大量增殖 分泌特异性抗体
(6)骨髓 造血干
(7)主动运输(主动吸收)
27．(高考试题：2006江苏)(8分)基因工程又叫基因拼接技术。
(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的 ▲ 为模板， ▲ 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成 ▲ 。
(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、 ▲ 。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是 ▲ 。
(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与且的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有 ▲ 种环状DNA分子，它们分别是 ▲ 。
【答案】(8分)
(1)信使RNA(mRNA) 逆转录(反转录) 双链DNA(目的基因)
(2)动植物细胞 除去内含子
(3)3 运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子
28．(07模拟：山东济南5月理综)35．(8分)[生物一现代生物科技专题]
苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌，其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。
伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽，并因此导致昆虫死亡。1993年，中国农科院科学家成功地将苏云金杆菌伴孢晶体蛋白基因转移到棉花细胞内，培育出抗虫棉。
(1)转基因技术能够_______，因此，人们可以将不同种属间生物优良性状组合在一起，定向地改变生物的遗传性状。
(2)科学家培育出抗虫棉的基因操作一般要经历以下四个步骤：
①目的基因的获得:若已经知道了伴孢晶体蛋白的氨基酸序列，获得目的基因的最好方法是 ___________ 。
②重组载体的构建：质粒是常用的运载体，科学家在进行上述操作时，要用同一种______分别割质粒和目的基因。若目的基因的粘性末端如下图所示，则运裁体上能与之接合的粘性末端是：(在框内绘图作答)
DNA连接酶把两黏性末端连接起来形成重组载体。DNA连接酶实际上是把切口处的____连接起来。
③重组载体的转化和筛选。
④目的基因的表达和鉴定。
(3)如果将携带抗虫基因的重组质粒导入二倍体植物细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫
特性的转基因植物。经分析，该植物的某一染色体携带有目的基因(因此可以把它看作是杂合子)。理论上，在该转基因植物自交F1代中，出现不具有抗虫特性的植物的概率是_______。
(4)种植上述转基因植物，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成"基因污染"。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免"基因污染"，原因是______________
【答案】35.（共8分）[生物--现代生物科技专题]
（1）克服种属间远源杂交不亲和（1分）
（2）①化学合成法（1分）②限制性内切酶（1分）
磷酸和脱氧核糖（1分）
（3）1/4（1分）
（4）叶绿体中目的基因不会通过花粉传递给下一代（2分）
29．(07模拟：山东德州二模理综)35．（8分）【生物-现代生物科技专题】
科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。
请回答以下相关问题：
（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进细胞融合最好选择 方法。
（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其
思路如右图所示。请回答：
①酶A是指 ，酶B是指 。
②对已导入重组质粒的II进行"检测"的目的是 ；Ⅲ指代的细胞具有特点是 。
（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：
【答案】35．【生物--现代生物科技专题】
（除注明外，每空1分，共8分）
（1）电融合
（2） ①限制性内切酶 DNA连接酶
②检测目的基因在受体细胞中是否
进行了表达（或检测受体细胞是否显示出目的基
因控制的性状）既能无限增殖又能产生特定抗体
（3）
（注：获得重组细胞1分，筛选1分，体外培养1分）
30．(高考试题：2007海南生物)19.已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是____________________。
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和_____酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的_________和_________连接起来。
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能___________。
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用____________与_________进行抗原--抗体特异性反应实验，从而得出结论。
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列_______（相同、不同），根本原因是_____________________________________________________________。
【答案】19.
（1）逆转录
（2）DNA连接 载体 S基因
（3）复制 合成S基因的mRNA
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清
（5）相同 表达蛋白质所用的基因相同
31．(高考试题：2007海南生物)20.某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是___________。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是____________________________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_____________。
（5）已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A．B两组，A组细胞培养液中加入___________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A．B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的________或_______合成水平的差异，确定Y的药效。
【答案】20.（1）多
（2）血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液pH
（3）停止 多 胰蛋白酶
（4）抗生素
（5）Y mRNA 蛋白质
32．(高考试题：2007山东理综)35.（8分）【生物-现代生物科技专题】
继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。
（2）进行基因转移是，通常要将外源基因转入___________中，原因是_____________。
（3）通常采用_______技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。
(5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的_____转入________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为_______
【答案】35.（8分）【生物-现代生物科技专题】
（1）纤维注射
（2）受精卵（早期胚胎）；受精卵（或早期胚胎）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达
（3）DNA分子杂交（4）膀胱上皮
v （5）细胞核 ； 去核的卵； 核移植（或克隆）
33．(07模拟：海南调研)19．（18分）苏云金芽孢杆菌生长到一定阶段，菌体内一端形成芽孢，另一端形成一种被称为伴孢晶体的蛋白质晶体。菌体破裂后释放出芽孢和伴孢晶体，伴孢晶体本身并无毒性，是毒素的前体。当昆虫吞食伴孢晶体后，在肠道内碱性环境条件下和特定的蛋白酶的作用下，伴孢晶体变成毒素分子，能使小肠上皮细胞萎缩退化，昆虫停食，最后脱水死亡。科学家利用苏云金芽孢杆菌的这个特性，在实验室大量培养，制成生物农药，洒在农作物上，让害虫吃后中毒死亡。或利用基因工程技术，把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因转到农作物体内，培育出抗虫品种。
请根据上述材料回答下列问题：
(1)基因工程操作的基本步骤是 。
(2)作为目的基因运载体的细菌质粒分子往往要带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中主要用于 。
(3)苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否表达，其检测方法是 。
(4)下图中，切断a处的工具酶是 ，切断b处的酶是 。
(5)苏云金芽孢杆菌的抗虫基因转到农作物体内后，也能产生伴孢晶体蛋白，说明 。
(6) 转基因工程改良动植物的品种，最突出的优点是 。
(7)大面积种植抗虫棉会对该地区生态平衡造成怎样的影响？
【答案】19．（ 18分）
(1) 提取目的基因，目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和表达（4分）
(2)检测目的基因是否导入受体细胞（2分）
(3)检测棉花是否有抗虫的性状（或检测棉花细胞中是否有抗虫基因所转录的RNA或检测棉花细胞中是否有抗虫基因所表达的蛋白质）（2分）
(4)限制性内切酶（2分） DNA解旋酶（2分）
(5)所有生物共用一套遗传密码（2分）
(6) 能打破按常规育种难以突破的物种之间的界限（2分）
（7）①破坏食物链 ②影响生物多样性（2分）
34．(07模拟：海南调研)20．（18分）近年来，我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA 。 G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原，它们刺激人体可诱导产生相应抗体和细胞免疫。人被带毒动物咬伤后，一旦感染，若不及时采取有效防治措施，可导致严重的中枢神经系统急性传染病，病死率高。人被咬伤后，病毒从伤口进入，先停留在伤口周围的神经背根神经节内，然后沿着传入神经传到脊髓，再上行到脑内，并在其中大量繁殖。机体感染病毒后产生的特异性lgG抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗，已取得良好效果。
请根据上述材料，回答下列问题：（18分）
（1）狂犬病病毒的毒力可发生变异。从自然感染动物体内分离的病毒株称为野毒株，其致病力强。将野毒株在家兔脑内连续传50代后，变成固定毒株。固定毒株对人及动物致病力弱，不引起狂犬病。巴斯德首先利用固定毒株制成减毒活疫苗，预防狂犬病。制成减毒活疫苗需要用 培养。
（2）特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中，应用的动物细胞工程的技术是 。
（3）下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的"小鼠细胞"是_________细胞，该细胞能够产生 。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射特定的物质是 。
② 图中B过程是细胞融合，该过程进行需要用灭活的 __ 、聚乙二醇或电激等诱导。
③ 特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有 等优点。
（4）动物细胞体外培养需要满足的环境条件有 。
（5）单克隆抗体技术还有哪些用途？
。
【答案】20．（每空2分，共18分）
(1)活细胞
（2）动物细胞融合技术
（3） ① B淋巴（或效应B） 抗体 抗原（或狂犬病病毒）
② 病毒（或仙台病毒）
③ 特异性强， 灵敏度高，可大量制备
（4）无菌无毒、温度和pH值、气体、营养物质
（5）作为诊断试剂、运载药物（或生物导弹）等
35．(高考试题：2007山东理综样题)现代生物科技专题 10分)
自然情况下，牛的生育率很低，通过现代科技手段，可以实现良种牛的快速繁殖。请按照提示，回答下列问题：
(1)现有一头良种雄性黄牛，请你提供一种简便的方法，使这头公牛在一年内繁殖数千头自己的后代。
(2)现有一头良种雌性黄牛，采用胚胎移植的方法，可使这头良种牛一年生下数十头自己的后代。
简述操作步骤(至少写出其中的4个重要步骤)
(3)采用什么方法可以使普通黄牛产下奶牛、良种肉牛等多品种小牛。
【答案】35. (现代生物科技专题10分)
(1)人工授精(体外受精等答案不得分。)(3分)
(2)①用激素对良种母牛(供体)、代孕母牛(受体)进行同期发表处理；
②用激素使供体母牛超数排卵；
③配种(自然交配)或人工授精；
④收集胚胎(冲胚)；
⑤胚胎(分割)移植；
⑥受体母牛妊娠检查：
⑦受体母牛产下后代(以上步骤每写对一条给1分，最多得4分。)
(3)体外受精、早期胚胎的体外培养、胚胎移植(只答体外受精和胚胎移植就得分，如果答体内受精，必须有冲胚和胚胎移植的过程才得分) (3分)
36．(高考试题：2007宁夏理综)B．[生物--选修3现代生物科技专题]
现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。
（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_______注入B品种牛的
_________卵母细胞，经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_______，将该胚胎移入代孕母牛的_______中，通过培育可达到目的。
（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量______，为解决这一问题，可以用______激素处理B品种母牛。
（3）克隆牛的产生说明_____具有全能性。克隆牛的性状主要表现____品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自______个亲本，细胞质来自______性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成______（相同，不同）。
【答案】B．[生物--选修3现代生物技术专题]
（1）细胞核 去核 重组胚胎 子宫
（2）不足，促性腺
（3）动物体细胞核 A 两 雌 不同
37．(高考试题：2007江苏生物)42．选做题(7分)
本题有A、B两题，请任选一题在答题卡指定位置作答，并把所选题目对应字母后的方框涂满涂黑。
B题．很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代，美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程。
(1)获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外，还可以 ▲ 。将目的基因与运载体结合时必须用 ▲ 酶和DNA连接酶。在基因工程中，常用的运载体有
【答案】 B题 (1)人工合成 同种限制 质粒(或动植物病毒或噬菌体等) 标记基因
(2)脱分化(或去分化) 胚状体 人造种皮
38．(07模拟：山东滨州第三质检)35．（8分）【生物-现代生物科技专题】
科学家将人的胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并使其成功地在大肠杆菌
中得以表达。操作过程如图，请根据图回答问题：
（1）能否用人的皮扶生发层细胞代替图中的胰岛细胞，为什么 。
（2）若将目的基因与质粒A结合形成重组质粒， 需要 酶的作用。
（3）在导入过程中可能会出现三种情况：即将重组质粒导入受体细胞、将质粒A导入受体细胞、没有任何质粒进入细胞；如何去除没有导入质粒的大肠杆菌
，原理是 。
（4）如果把已经导入普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，将发生的现象是 ，原理是 。
【答案】35．（除特殊说明外，每空1分，共8分）
（1）不能，该细胞中胰岛素基因未表示，不能形成胰岛素mRNA（2分）
（2）限制性核酸内切酶，DNA连接酶（只答一项不给分）
（3）将得到的大肠杆菌拉种到含有氨苄青霉素的培养基上培养
普通质粒和重组质粒上有抗氨苄青霉素基因，可使大肠杆菌具有抗青霉素的能力
（4）有的生长，有的不能（2分）
导入普通质粒A的大肠杆菌生长，因为普通质粒上有四环素抗性基因，导入重组质粒的大肠杆菌不生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因上，破坏了其功能。
39．(07模拟：山东青岛二模理综)35．（8分）【生物--现代生物科技专题】
请思考并回答下列有关现代生物科技方面的问题：
（-）动物细胞培养
（1）动物细胞培养时，要保证细胞必需的营养、适宜的温度和pH条件，还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境。为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要 。
（2）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是
。
（二）胚胎工程
（1）在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是
，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
（2）在胚胎工程中，通过给良种母畜注射外源 ，使其排出更多的卵细胞，称为超数排卵。
（3）进行胚胎分割时，应选择发育到 时期的胚进行操作。
（4）通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的特点是
。
（三）单克隆抗体制备
（1）经人工诱导后，骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行 。
（2）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞）与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为"生物导弹"，这是利用了 。
【答案】35．（8分）【生物--现代生物科技专题】（每空1分）
（一）（1）在培养液中加入一定量的抗生素，定期更换培养液（答上一点即得分）
（2）10代以后的细胞遗传物质可能发生突变（或保证供体细胞正常的遗传基础）
（二）（1）使供、受体的生理条件达到同步或者一致
（2）促性腺激素
（3）桑椹胚或囊胚
（4）具有相同的遗传物质
（三）（1）筛选和检测
（2）抗原、抗体之间结合的高度特异性
40．(07模拟：山东烟台5月诊断)34．（8分）[生物--现代生物科技专题]
供体器官的短缺和排斥反应是制约品官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这些问题。
下图是治疗性克隆的过程图解。
（1）正常情况上，去核的卵细胞取自于女性卵巢排卵后在输卵管中 期的卵细胞。
（2）重组细胞发育的过程中，细胞开始分化发生在 期。
（3）治疗性克隆所用的技术名称是 ，要想获得基因型完全相同的两个胚胎，可采用 技术。
（4）已知患者又是红绿色盲的女性，图是提供卵细胞的为完全正常的年轻女性。移植器官后，该患者所生育子代红绿色盲的情况是 。
（5）我国禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，请你谈谈为什么要反对克隆人？（至少写出二条理由）。
【答案】34．（8分，（1）~（3）小题每空1分，（4）-（5）每小题2分）
（1）MII
（2）囊胚
（3）核移植技术 胚胎分割
（4）男孩红绿色盲，女孩不一定
（5）（至少写出两条，只要答案符合题意就给分）
①严重违反了人类伦理道德
②冲击了现有婚姻、家庭和两性关系等传统的论理道德观念
③是在人为地制造心理上和社会地位上都不健全的人
④克隆技术尚不成熟，可能克隆出有严重生理缺陷的孩子
41．(高考试题：2007广东生物)41.（现代生物科技专题，15分）
香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜
冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）
引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于
无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段
提高其种质水平，具有重要意义。
请根据上述材料，回答下列问题：
（1)简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。
（2）脱毒香蕉苗的获得，可采用＿的方法，此方法的依据是＿和＿。
(3）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法
检测病毒的存在？（列举两种方法）
(4)在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因帅对提高农作物的抗寒能力有较好的应
用价值，该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。试述在提取和纯化DNA时
影响提纯效果的因素及其依据。（列举两点）
（5）如何利用帅基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？在运用转
基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题？（列举两点）
（6)从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。另外，
抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期，请描述采用蛋白质工程技
术降低该酶活性的一般过程。
【答案】41．（15分）
(1)选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织·，然后通过调整植物激素比
例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成
人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。
(2）茎尖（分生组织）组织培养；茎尖不带病毒（或病毒在植物体内分布不均
匀）；植物细胞全能性。
(3)①BBTV病毒基因的检测（DNA分子杂交技术）；②BBTV病毒蛋白的检测
（获得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。
(4）①选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中溶解
度不同的特性，达到分离目的；②加人一定量酒精，使部分蛋白质杂质溶解于
酒精，与DNA分离；③加人蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；④控制DNA提
取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。
（5)将帅基因插人土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导人香
蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。
生态安全问题包括：①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因
植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影
响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响。
（6）体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成
杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种（或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等
方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品种）。
蛋白质工程方法的步骤为：①果胶裂解酶蛋白的功能分析，②果胶裂解酶蛋白
的结构预测和设计，③果胶裂解酶基因的改造。
立意：引导考生关注对科学、技术和社会发展有重要意义的生物学新进展；考查考生对
细胞工程、基因工程及蛋白质工程等现代生物科技内容的掌握，考查考生对转基
因生物的安全性问题的理解；考查合理运用现代生物科技手段解决自然界和社会
生活中的生物学问题。