高三生物细胞工程复习测试
整理人：山东省平邑第一中学 高月和
考点回顾
考点11 植物细胞的全能性
考点12 植物组织培养
考点13 植物体细胞杂交
植物细胞的全能性的概念、原因、不同细胞全能性的高低比较（受精卵＞卵细胞＞体细胞）
植物组织培养原理、过程（脱分化、再分化、愈伤组织含义）、应用（快速繁殖等）
植物体细胞杂交原理、最大优点、目的、过程（原生质体制备；原生质体融合诱导；杂种细胞的筛选与培养；杂种植株的再生与鉴定）
考点14 动物细胞培养
考点15 动物细胞融合
考点16 单克隆抗体
动物细胞工程常用技术手段（5点）
动物细胞培养：培养液制备，培养细胞的来源与处理、培养过程[原代培养—传代培养—细胞株—细胞系（遗传物质改变，带有癌变的特点）]、应用。
动物细胞融合的原理、最重要用途。
单克隆抗体的含义、制备原理、优点、应用（“生物导弹”及优点）
单克隆抗体的制备：获取效应B细胞与骨髓瘤细胞；细胞融合与杂交瘤细胞筛选；产生特定抗体的杂交瘤细胞群的筛选与培养；体内或体外大规模培养及单克隆抗体的提取。
真题演练
一、选择题
1．[2005·广东，5]关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ）
A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断
B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C、可以利用基因工程技术生产
D、可以在生物体内生产，不能体外生产
2．[2005·上海，26]将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是
A、具有完整细胞核的细胞
B、一定的营养物质和植物激素
C、离体状态
D、导入指定基因
3．（2004·全国卷Ⅰ，1）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
4．（2002·全国，4）一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能
A 有选择地繁殖某一性别的家畜
B 繁殖家畜中的优秀个体
C 用于保存物种
D 改变动物的基因型
4．（2002·全国春季，4）以性染色体为XY的牛体细胞核取代卵细胞核，经过多次卵裂后，植入母牛子宫孕育、所生牛犊
A 为雌性 B 为雄性
C 性别不能确定 D 雌、雄性比例为1︰1
6．（2002·上海，6）科学家将雌黑鼠乳腺细胞的细胞核移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后移植入褐鼠的子宫，该褐鼠产下小鼠的体色和性别是
A．黑、雌 B．褐、雌
C．白、雄 D．黑、雄
7．（2001·上海，21）胚胎移植技术目前主要应用于
A 解决某些不孕症者的生育问题
B 治疗某些遗传病
C 提高良种家畜的繁殖力
D 提高动物的抗病力
8．（2001·津晋，5）科学家用小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓癌细胞融合的是
A．经过免疫的B淋巴细胞
B．不经过免疫的T淋巴细胞
C．经过免疫的T淋巴细胞
D．不经过免疫的B淋巴细胞
二、简答题
4．（2004·江苏，39）（8分）紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。下图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。
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（1）在生产前，需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培养技术，将紫草叶肉细胞经过________________而获得的。这项技术的理论基础是_______。
（2）从图中可以看出：反应器中紫草细胞的生长呈现______________________________规律；影响紫草素产量的因素是___________和________________________。
（3）在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是_____________________和______________________________。
模拟高考
A组
1．（05.5清华附中）科学家用小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的Ｂ淋巴细胞融合，得到的杂交细胞不正确的叙述是：( )
Ａ、有双亲细胞的遗传物质
Ｂ、无增殖的本领
Ｃ、可分泌特异性抗体
Ｄ、有大量增殖的本领
2．（05.5吉林）下列有关生物工程方面的叙述中，正确的是 （ ）
A．叶肉细胞离体培养时，经再分化过程可形成愈伤组织
B．培养流感病毒时应选用无菌的牛肉汤
C．在青霉菌体内获取青霉素属于基因工程的实例
D．基因工程、细胞工程都能克服远缘物种杂交之间障碍
3．（05.5中山中学）某种花卉感染了植物病毒，叶子出现疱状，欲培养出无病毒的后代，应采取的方法是
A．用种子培养后代
B．用无明显症状部分的枝扦插
C．用茎尖进行组织培养诱导出植株
D．用叶表皮细胞进行组织培养，诱导出植株
4．（05.5中山中学）若将混合的小白鼠骨髓瘤细胞和淋巴细胞放入宇宙飞船的主要目的是在微重力的作用下
A．提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的突变频率
B．提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的繁殖能力
C．提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的融合几率
D．促进B淋巴细胞产生抗体
5.（05.5重庆）生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成为“复生”野驴的方法是
A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体
B.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C.取出野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体
D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
二、简答题
6．（05．4重庆）（24分）下图是有关生物细胞生活史的概括，请据图分析回答问题：
（1）③所示的变化，在生物学上称
为 。
（2）F→G→H过程的技术，在植物学上叫 ，其理论基础是 。该植株的产生与“克隆羊”的产生都属于 繁殖。
（3）⑦所示的过程叫 。
（4）假如 A细胞的分裂只有①②过程，那么该细胞的分裂方式是 ，其遗
传物质分配的特点 。
（5）医学上，对于癌症病人通常采取手术切除肿瘤，或进行“化疗“。“化疗”的基本原理是通过化学药物作用于细胞周期的间期，抑制癌细胞增殖，从而达到控制病人病情恶化的目的。“化疗”能控制病情恶化是因为化学药物能通过抑制 终止[ ] 增殖的目的。
（6）程序性死亡是一种主动的由基因决定的细胞自我破坏的过程，已知人的神经系统在发育过程中，约有50％的细胞发生程序性死亡。请用学过的生物学知识，简析为什么有的神经细胞发生程序性死亡而有的神经细胞却继续存活。
7．（05.4苏州）（18分）将二倍体的阔叶粉花烟草（AAbb）和柳叶黄花烟草（aaBB）两个品种，通过植物体细胞杂交方法培育出杂种植株（AAaaBBbb），其表现型为阔叶黄花。请回答；
（1）植物体细胞杂交过程中，首先去掉细胞壁获得原生质体，其常用的方法是 ；诱导原生质体融合常用的化学试剂是 。原生质体融合的结构基础是 。
（2）获得杂种细胞后，还要经 技术才能获得杂种植株，此过程所依据的原理是 。获得的杂种植株是 倍体。
（3）利用上述两个品种来培育杂种植株AAaaBBbb，除上述方法外，还可以用其它的育种方法。请用遗传图解表示育种过程并作简要的文字说明。
B组
1．(05.5岳阳)驱蚊草(又名蚊净香草)含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是
A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍
B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法
C．驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗形成
D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离
2．（05.5苏州）下列关于生物工程中常用的几种酶的叙述中，错误的是
A．一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，能用于提取目的基因
B．DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合，能形成重组DNA
C．纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁，能用于植物体细胞杂交
D．胰蛋白酶能使动物组织分散成单个细胞，能用于动物细胞培养
3．（05.5苏州）生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖种苗，该过程不涉及细胞的
A．有丝分裂 B．减数分裂
C．细胞脱分化 D．细胞再分化
4．（05.5启东中学）灭活的仙台病毒（ ）
A、失去抗原性，具有感染力
B、具有抗原性，也具有感染力
C、失去抗原性，也失去感染力
D、具有抗原性，失去感染力
5．（05.4苏州）下列关于细胞工程的叙述中，正确的是 （ ）
A．植物细胞必须先用胰蛋白酶处理细胞获得原生质体
B．试管婴儿技术包括细胞核移植和胚胎移植两方面
C．经细胞核移植培育出新个体只具有一个亲本的遗传性状
D．用于培养的植物器官属于外植体
6．（05.5南师）（20分）金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎的新品种。请据图回答：
（1）转基因时往往需对②进行扩增，假设②含有800个碱基对，其中含有腺嘌呤脱氧核糖核苷酸600个，连续复制5次后，需消耗周围环境中鸟嘌呤脱氧核苷酸 个。②与①上的某种基因在结构上的最大区别是
。
（2）经检测④植株的叶片细胞已有了②，但还没有具备抗病性，这说明②没有 ，需对②结构的 部位进行修饰。
（3）如果④植物的叶片已经具备了抗病性，该变异属于 （可遗传变异、不可遗传变异），变异的原理是 。
（4）欲快速培育大量该抗病新品种，可采用的技术是 ，依据的理论基础是
。
7．（05.5南通）(21分)我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图，请据图回答：
 |
(1)过程④和⑤要经过____________、__________和______________________。
(2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养
基中加入____________。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证____________________。
(3)从育种的角度来看，植物组织培养与有性繁殖相比，优势主要有(列举两条)：
_______________________________________________________________。
(4)与植物组织培养的培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外，通常还要添加___________________。
C组
1．（05.5京城教育）某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有 处不正确？
| 植物细胞工程 | 动物细胞工程 | |
| 技术手段 | 植物组织培养 植物体细胞杂交 | 动物细胞培养和融合 单抗制备等 |
| 特殊处理 | 酶解法去除 细胞壁 | 胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液 |
| 融合方法 | 物理方法 化学方法 | 物理方法 化学方法 生物方法 |
| 典型应用 | 生产人工种子 培育种间植物 | 单克隆抗体的制备 |
| 培养液区别 | 蔗糖是离体组织赖以生长的成分 | 动物血清不可缺少 |
A.
0 B.
2．（05.5中山中学） 关于细胞工程的说法不正确的是
A．培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同
B．单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大
C．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行
D．在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关
3．（05.5广东）一系列实验证明细胞膜具有流动性。荧光抗体免疫标记实验就是其中的一个典型例子。下图表示了人、鼠细胞融合的过程，研究中分别将带有绿色荧光、能与人体细胞膜上HLA抗原特异性结合的抗体和带有红色荧光、能与小鼠细胞膜上H—2抗原特异性结合的抗体放入细胞培养液中，对人、鼠细胞进行标记。下列有关该实验的叙述不正确的是
A．要使实验现象明显，可以适当提高细胞培养液的温度
B．选取不同生物细胞进行融合是因为不同生物细胞表面抗原差异较大
C．实验表明不同种细胞可以杂交，而同种生物细胞不能进行融合
D．实验结果可以直接证明细胞膜上的蛋白质分子可以运动
4．（05.5潍坊）生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是
A．能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制
B．能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活
C．能抑制淋巴细胞的DNA复制
D．能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成
5. （05.5天津河西区）关于细胞全能性的理解不确切的是
A. 大量的科学事实证明，高度分化的植物体细胞仍具有全能性
B. 细胞内含有个体发育所需全部基因是细胞具有全能性的内在条件
C. 通过植物组织培养得到的试管苗或人工种子，是植物细胞在一定条件下表现全能性的结果
D. 通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系，表
明了动物体细胞也具有全能性
6．(05.5武汉)（20分）动物细胞的培养常用于生理、病理、药理等方面的研究。下图示动物细胞培养的部分过程： （1）图示中A与B处理所用的物质是
。
(2)在细胞的分裂增殖过程中，为了确定DNA合成的时间长短，加入以3H标记的 （腺嘌吟、鸟嘌吟、胞嘧啶、胸腺嘧啶）最合适；培养中的细胞数目的增加和培养时间的关系如下图（一）所示，据图读出细胞完成一个细胞周期所需要的时间（T)是 小时；若一个细胞中的DNA的含量为2N，分裂期所需要的时间为5小时，请在下图（二）中画出一个细胞周期中DNA的量变。
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（3)图中分装的过程称为 培养，成活的细胞叫作 ，一般能传40～50代，其遗传物质 （改变、不变）。若在细胞培养过程中加入灭活的仙台病毒，镜检可以看到 细胞。
专题 三 细胞工程参考答案
高考真题
1．D 单克隆抗体的生产可以在小鼠腹腔内生产，也可以在体外培养基中通过细胞培养的方法生产。
2．D 植物细胞组织培养的原理是细胞的全能性，细胞全能性的表达必须同时具备ABC三个条件。
3．B B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞不需要处理，在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下就可以融合。
4．D 通过克隆技术繁殖生物体，属于无性繁殖方式，后代保持亲本的性状，不会改变动物的基因型。
5． B 通过克隆繁殖后代，性别与提供细胞核的生物相同。
6． A 克隆技术产生的后代，性状和性别都与提供细胞核的生物相同。有些受细胞质基因控制的性状与提供去核卵细胞的生物相同；
7． AC 胚胎移植是让精子和卵细胞在体外试管内完成受精，并发育成早期胚胎，然后移植到母体或其他母体子宫内，完成胚胎发育的生物技术。
8．A 经过免疫的B淋巴细胞才能产生特异性抗体。39．（8分）（1）脱分化（或脱分化形成愈伤组织） 细胞的全能性（2）S型增长 细胞数量 细胞所处的生长期（3）保证氧气供应充足 使细胞与培养液充分接触
模拟高考
A 组
1．B 杂交瘤细胞具有小鼠骨髓瘤细胞和效应B细胞的遗传物质；继承了骨髓瘤细胞体外环境条件下无限增殖的能力和效应B细胞分泌特异性抗体的能力。
2．D 病毒为非细胞结构的生物，必须寄生在寄主细胞内才能表现出生命现象，所以不能在普通培养基中进行培养，一般用活的鸡胚进行培养；在青霉菌体内获取青霉素属于发酵工程的实例；经脱分化形成愈伤组织。
3．C 感染病毒的植物体，只有根尖和茎尖不含病毒。
4．C 微重力的作用下，可以排除因重力作用对细胞融合产生的干扰。
5．C 动物细胞的全能性受到限制，现在技术条件下通过组织培养还无法实现。 通过基因工程只能保存个别基因，不能保存物种。
6．（22分）（1）－（5）每空2分，（6）题4分）
（1）细胞分化
（2）组织培养//细胞的全能性//无性
（3）脱分化
（4）减数分裂//子细胞比母细胞减半
（5）DNA分子的复制//[ E ]癌细胞
（6）调控程序性死亡的基因在有些神经细胞中表达，使这些神经细胞发生程序性死亡（3分）；调控程序性死亡的基因在有些在神经细胞中没有表达，使这些神经细胞继续存活（3分）。
7．（18分）
（1）酶解法（用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁）；聚乙二醇；细胞膜流动性（每空2分）
（2）植物组织培养；植物细胞的全能性；四 （每空2分）
（3）
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粉花烟草 × 黄花烟草
（AAbb） （aaBB）
F1 阔叶
黄花烟草
（AaBb）
染色体加倍
阔叶黄花烟草（AAaaBBbb）
（6分）
B组
1．C 本题考查了植物细胞工程中的体细胞杂交的方法和优点以及与植物组织培养的关系。植物体细胞杂交的过程包括酶解法获得原生质体、原生质体诱导融合获得杂种细胞以及杂种细胞组织培养获得杂种植株三个环节。
2． B DNA连接酶可以促进3/-5/磷酸二酯键的形成把目的基因与运载体粘性末端的脱氧核苷酸黏合，形成重组DNA分子。两个黏性末端间的碱基通过氢键相连。
3． B 减数分裂是有性生殖过程所特有的，组织培养属于无性生殖过程。
4． D 灭活的仙台病毒之所以能够促进细胞的融合，就是利用了其抗原性与两个融合细胞细胞膜上的受体蛋白发生特异性结合，但是如果具有感染力融合细胞又会因感染病毒而死亡。
5．D 植物细胞必须先用纤维素酶和果胶酶处理而获得原生质体；试管婴儿技术包括体外受精、体外发育（细胞培养）和胚胎移植三个方面。精子和卵细胞在试管内完成受精形成受精卵，然后发育成早期胚胎，再移植母体子宫内。经细胞核移植培育出的新个体其性状主要与提供细胞核的亲本相同，但是许多受细胞质遗传物质控制的性状与提供去核卵细胞的亲本相同。
6．（21分）
（1）6200（G=1/2×800×2-600=200
（25-1）×200=6200）（4分）编码区是不连续的或②有内含子和外显子（2分）
（2）表达（2分） 非编码区（3分）
（3）可遗传的变异（2分） 基因重组 （3分）
（4）组织培养（2分） 细胞的全能性（3分）
7．（21分）
（1）细胞分裂 细胞（组织）分化 组织器官的形成（逐渐发育成为新的植物体）（6分）
（2）植物激素（植物激素类似物） 无菌（6分）
（3）能保持母本的优良性状 ；培养周期短，繁殖效率高；能培养无病毒植物（6分）
（4）动物血清（3分）
C组
1．A 考查动物细胞工程和植物细胞工程的区别
2．C 不仅动、植物细胞的培养需要在无菌条件下进行，而且其它生物工程的操作也必须在无菌条件下进行。
3．C 适当提高温度会增强细胞膜的流动性；不同生物细胞表面抗原差异较大试验效果更明显；同种生物细胞也能融合。
4．A 培养基中含有 ① 骨髓瘤细胞和融合的骨髓瘤细胞②效应B细胞和融合的效应B细胞 ③骨髓瘤细胞与相应B细胞融合的杂交瘤细胞三类。其中第二类不能分裂，所以只要能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制就可以选择出杂交瘤细胞
5．D 通过动物细胞培养获得的细胞株或细胞系，不是动物个体，细胞的全能性并未得到表达。
6．（20分）
（1）胰蛋白酶（3分）
（2）胸腺嘧啶（3分） 20（3分）DNA的量变曲线如下图 （3分）
（3）传代 细胞株 不变 多核（8分）
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点拨：细胞数从50增长到100，平均繁殖1代，所用时间为20分钟；细胞融合首先是细胞质的融合，然后才是细胞核的融合，在细胞核未融合前细胞内可能含有多个细胞核